ПЦР диагностика на гепатит: что это такое

 

ПЦР (Полимеразная цепная реакция) – это способ диагностики ДНК и РНК возбудителя в лабораторных условиях. Впервые был введен американцем Кэри Муллисом порядка 50 лет назад.

ПЦР анализ отличается высокой чувствительностью, поскольку предоставляет возможность обнаружить возбудителя гепатита всего по одной молекуле, выявленной в биологической жидкости или коже.

ПЦР на гепатит С

Что такое ПЦР диагностика при гепатите

Сущность диагностики состоит в том, что частицу вируса принуждают размножаться in vitro (в пробирке) путем создания определенных условий и с применением специальных ферментативных веществ. ПЦР позволяет провести генотипирование возбудителя гепатита С. Это обеспечивает эффективность терапии, поскольку различные штаммы вируса неодинаково реагируют на противовирусные лекарственные средства.

Существует 2 вида ПЦР анализов на гепатит:

  • качественный;
  • количественный.
Проводимое лечение противовирусными препаратами следует систематически контролировать, так как иногда возникает необходимость корректировки терапии. С этой целью выполняют ПЦР диагностику.

Качественное и количественное исследование

  1. В первом случае выявляют в крови больного возбудителя и устанавливают его генотип. Генотипирование нужно для правильной диагностики, прогноза болезни и выбора тактики лечения.
  2. Если вирус гепатита С методом ПЦР в крови обнаружен, проводится количественное исследование. Последнее помогает высчитать количество молекул РНК возбудителя, находящихся в биологической жидкости пациента.

Качественный ПЦР на гепатит С

Подготовка к ПЦР диагностике гепатита

Для осуществления процедуры берут кровь из вены. Это лучше выполнять утром натощак.

Больному необходимо правильно подготовиться к ПЦР анализу на гепатит С:

  • За 10 часов до манипуляции исключить прием пищи, допускается употреблять чистую воду.
  • За день до процедуры исключить прием алкогольных напитков, за 4 часа до анализа не курить.
  • Перед исследованием не подвергаться физическим нагрузкам и эмоциональным потрясениям.
  • За 2 дня до взятия крови для проведения ПЦР на гепатит С перестать принимать лекарственные препараты. Если данное условие не выполняется, следует поставить в известность лаборанта, поскольку употребление некоторых лекарств приводит к ошибочно положительному результату исследования.
Читайте также:  Пониженный билирубин у взрослого или ребенка: причины

ПЦР на гепатит С

Положительный ПЦР анализ на гепатит С свидетельствует о неустанном размножении возбудителя и повреждении гепатоцитов.

Последующую количественную ПЦР диагностику гепатита С измеряют в МЕ/мл, или в копиях/мл. Это значит, какое количество копий РНК возбудителя гепатита С определенного генотипа выявлено в 1 мл крови.

Уровнем вирусной нагрузки определяется содержание РНК возбудителя в биологической жидкости пациента. У здорового человека результат ПЦР на гепатит С – отрицательный. Это говорит о том, что в крови исследуемого возбудитель выявлен не был.

Анализ ПЦР на гепатит

Ниже в таблице представлена расшифровка количественного исследования на гепатит С методом ПЦР:

Вирусная нагрузка (содержание вируса в копиях/мл) Оценка нагрузки Характер репликации возбудителя
103 и меньше Крайне низкая Неактивная
104 — 105 Низкая Как правило, неактивная
106 Средняя Активная
107 Высокая Очень активная
  1. Низкая вирусная нагрузка свидетельствует о том, что лечение выбрано правильно, и исход болезни – благоприятный.
  2. Большая концентрация возбудителя говорит об остром заболевании. Пациент заразен для окружающих.
  3. Средние показатели вирусной нагрузки — свидетельство хронического гепатита. Они могут изменяться в сторону и увеличения, и уменьшения.

Количественное исследование методом ПЦР больному с гепатитом С выполняют на протяжении всего противовирусного лечения: через 1 месяц, 3 и 6 месяцев.

По окончании терапии назначают контрольную ПЦР диагностику.

ПЦР на гепатит B

ПЦР на гепатит B выполняют с целью выявления ДНК возбудителя.

Содержание ДНК определяют в копиях/мл или МЕ/мл. Результат исследования оценивают следующим образом:

  • < 2х10, говорит о том, что острая стадия не перейдет в хроническую;
  • от 2х104 до 2х106 – в 30% случаев имеет место хронизация процесса;
  • >2х106 – в 95% случаев процесс будет хроническим.
Количественная ПЦР диагностика – основной способ определения обострения заболевания, обнаружения латентного носительства инфекции.

ПЦР на гепатит B

Расшифровка ПЦР диагностики

Качественное исследование может быть:

  • положительным;
  • отрицательным.

Отрицательный результат свидетельствует об отсутствии вируса гепатита в крови.

Положительный анализ говорит о выявлении РНК возбудителя определенного штамма.

Достоверность ПЦР анализа на гепатит составляет 95%. 5% —ошибка из-за халатности персонала. Такое случается вследствие повышенных требований к выполнению анализа:

  • соблюдение определенных условий хранения реактивов;
  • высокая квалификация медицинских работников;
  • чистота взятого материала.

Сам анализ характеризуется 100% диагностической точностью.

Количественное ПЦР исследование на гепатит дает возможность оценить вирусную нагрузку на организм. Анализ позволяет:

  • уточнить стадию болезни;
  • узнать эффективность противовирусной терапии;
  • определить необходимость проведения биопсии печени.
Читайте также:  Антитела к гепатиту С: остаются ли после лечения

Иногда пациент не ощущает себя заболевшим, а ПЦР анализ выявляет инфицирование. Это говорит о ранней стадии болезни или хронической форме. Для точной диагностики следует провести дополнительные исследования и начать адекватную противовирусную терапию.

Расшифровка ПЦР диагностики

Государственные учреждения выполняют анализ на бесплатной основе. Достаточно направления от врача-инфекциониста или гепатолога.

Платно исследование делают во всех больших городах нашей страны. Цену определяют тип исследования, имеющееся оборудование, время, затраченное на анализ.

  • Качественная ПЦР диагностика в Москве и Санкт-Петербурге будет стоить 600-900 руб. В области –300-800 руб.
  • Количественный ПЦР анализ на гепатит С обойдется в 17000-22000 руб., на гепатит В — 1200-10000 руб.

Преимущества и недостатки исследования

Основными достоинствами ПЦР диагностики становятся:

  • Широкий диапазон использования. Применяя стандартное оборудование, можно выявить любой вирус.
  • Точность обнаружения вируса. Используя разные сочетания ферментов и технику выполнения анализа, получают 100% спецификацию анализа для нужного возбудителя.
  • Высокая чувствительность. Данным методом обнаруживается в крови даже одна молекула возбудителя.
  • Быстрота. На качественный анализ уходит несколько часов, количественный готов через пару суток.
  • Определение возбудителя в инкубационном периоде. ПЦР выявляет вирус гепатита С не по наличию иммуноглобулинов, когда уже сформировался иммунный ответ, а до развития патологической реакции, что облегчает терапию.

Недостатки ПЦР диагностики становятся следствием ее преимуществ:

  1. необходима высокая степень чистоты, в том числе, лабораторного воздуха, чтобы другие РНК не проникли в образец;
  2. повышенные требования к медицинскому персоналу.

Результаты оценивает специалист, способный отличить подлинный анализ от ошибочно положительного (когда терапия завершена, а в крови остался нежизнеспособный возбудитель). Встречаются ложноотрицательные анализы (при клинической картине возбудителя не находят).

Буната Дмитрий Мариянович

Автор статьи врач-инфекционист, гепатолог
© 2019. Все права защищены.

Ссылка на основную публикацию